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Lymphocytes (phénotypage des)
Lymphocytes CD4 et CD8
Les lymphocytes comprennent
•
les lymphocytes B, issus de la moelle osseuse et dont la fonction
principale est de sécréter des anticorps;
•
les lymphocytes T, issus eux aussi de la moelle mais passés par le
thymus, et chargés principalement de la destruction des cellules.
Les lymphocytes portent à leur surface des molécules membranai-
res susceptibles d’être reconnues par des anticorps spécifiques. Ces
antigènes de surface (ce sont des antigènes puisqu’ils sont détec-
tés par des anticorps) sont détectés par des anticorps monoclonaux
spécifiques. Ils sont appelés CD (pour cluster of differenciation) et
sont numérotés. Ils permettent de classer les lymphocytes en T et B,
et à l’intérieur de ces deux groupes, en plusieurs sous-populations.
Dans le sang normal la population lymphocytaire T est majoritaire
(
75 % des lymphocytes), exprimant toujours l’antigène CD3. Les
lymphocytes T se répartissent en deux sous populations : lympho-
cytes T amplificateurs de la réponse immune (ou helpers) portant
l’antigène CD4, lymphocytes T suppresseurs (ou killers) portant
l’antigène CD8.
Les lymphocytes B sont reconnus grâce à leurs antigènes communs
dits Pan B (CD19 et CD20). D’autres antigènes caractérisent des sous-
populations B (CD21 et CD22) ou des lymphocytes B activés (CD23).
Indications
•
Diagnostic des leucémies et lymphomes chroniques de type B sur-
tout en complément de l’analyse morphologique.
•
Suivi des patients infectés par le VIH.
Prélèvement
H
Sang veineux sur anticoagulant.
Moelle osseuse prélevée par ponction sternale.
Méthode
Après lyse des globules rouges, les différentes populations lympho-
cytaires sont marquées par des anticorps monoclonaux liés à un
fluorochrome. Les cellules fluorescentes sont ensuite comptées en
cytométrie en flux (CMF). Les appareils actuels permettent d’analy-
ser plusieurs marqueurs à la fois, de cibler l’analyse sur des cellules
de taille et de morphologie définies.
B
C
D
E
Valeurs usuelles
•
Lymphocytes T (CD3) :
0 à 80 % des lymphocytes circulants (1000 à 3000/mm )
lymphocytes T4 (CD4) :
3
6
–
2
4
/3 des lymphocytes T
0 à 50 % des lymphocytes circulants (plus de 1500/mm )
3
F
–
lymphocytes T8 (CD8) :
G
1
2
/3 des lymphocytes T
0 à 30 % des lymphocytes (moins de 1000/mm )
3
•
Lymphocytes B (CD19) :
0 à 15 % des lymphocytes (200 à 500/mm )
I
3
1
Les résultats sont mieux exprimés en valeur absolue afin de tenir
compte des variations de la numération lymphocytaire.
J
K
L
Se méfier de possibles variations au cours du nycthémère (faire les
prélèvements aux mêmes heures) ou d’un jour à l’autre (ne pas hési-
ter à refaire la mesure).
M
N
O
P
Interprétation
Déficits immunitaires
Un important déficit en lymphocytes B et IgG s’observe dans l’agam-
maglobulinémie liée à l’X (maladie de Bruton) caractérisée par des
infections à répétition après la première année.
Q
R
S
Des déficits en cellules T s’observent dans des déficits immuni-
taires congénitaux comme le syndrome de DiGeorge (absence
de thymus, malformations cardiaques, dysmorphies faciales) ou
l’ataxie-télangiectasie (déficit immunitaire mixte sévère portant sur-
tout sur l’immunité humorale et ataxie cérébelleuse progressive).
T
U
V
W
X
Y
Z
Leucémies
Parmi les leucémies aiguës lymphoblastiques (LAL), celles de type B
(
développées à partir de blastes B) expriment généralement les
antigènes CD19, CD22, et l’antigène CALLA (CD10) de surface. Elles
peuvent être guéries chez l’enfant dans 80 % des cas.
En revanche, les LAL de type T expriment les antigènes CD3, CD5 et
CD7, diversement associés. Elles ont un pronostic plus favorable que
les LAL de type B chez l’adulte, alors que c’est l’inverse chez l’enfant
de plus d’un an.
Dans les leucémies lymphoïdes chroniques, la population lympho-
cytaire B exprime des antigènes CD19 et CD20 ainsi que des mar-
queurs inhabituels (CD5, CD23).
Infection à VIH
Le VIH a pour cible les lymphocytes T4. Il les pénètre, s’y développe
et finalement les fait éclater avant de se répandre dans le sang.
L’infection se caractérise donc par une diminution progressive des
cellules CD4.
3
Lorsque les lymphocytes T4 < 300/mm , la possibilité de développer
un sida dans les deux ans est de 80 %.
Le nombre de CD4 est corrélé avec l’apparition des infections oppor-
tunistes. C’est ainsi qu’apparaissent :
•
•
•
•
la tuberculose et le sarcome de Kaposi entre 500 et 200 CD4/µl;
la pneumocystose entre 200 et 100 CD4/µl;
la toxoplasmose cérébrale au-dessous de 100 CD4/µl;
les infections à cytomégalovirus (CMV), les mycobactérioses et la
leuco-encéphalopathie multifocale progressive (LEMP) au-dessous
de 50 CD4/µl.
Quelques marqueurs des lymphocytes
Antigènes
CD24
CD20
CD19
CD10
CD8
Cellules
Lymphocytes B
Cellules pré-B et lymphocytes B
Lymphocytes B
Précurseurs B
Lymphocytes T
Lymphocytes T
Cellules T
CD4
CD2